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恒遠解析:樣本的采集及貯運操作不當會影響ELISA實驗結果
更新時間:2016-06-02 點擊次數:1234

  ELISA(酶聯免疫試驗)以其靈敏度較高、特異性好的特點已廣泛用于科研實驗及臨床,越來越多科研單位選擇用ELISA實驗方法完成研究課題,所以,ELISA就有較大的科研前景。實驗的*步就是要準備好樣本,樣本的收集跟保存聽上去貌似很簡單,但不乏有許多客戶是因為樣本的收集跟保存沒做好而影響實驗結果。上海恒遠生物科技有限公司作為專業的ELISA試劑盒廠家必須對影響ELISA實驗結果各因素有一定的認識。才能為客戶提供zui的服務。的試劑 、好的儀器和正確的操作是保證ELISA試劑盒檢測結果準確可靠的必要條件。

下面就樣本收集跟保存兩點恒遠生物提幾個建議:

 1.嚴重溶血,以HRP 為標記的ELISA 測定中,殘留在孔內的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽性;

2.混有紅細胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內不易洗凈;如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應:

3.標本凝固不全 ,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結果;

4.采血試管洗滌不* 、反復使用易交叉污染:塑料試管能吸附抗原物質,樣本久置在塑料管內會使樣本內抗原含量下降造成假陰性。

   血清標本宜在新鮮時檢測,嚴重溶血標本禁用。一般說來,在 5 天內測定的血清標本可放置于4℃,標本在冰箱中保存時間過長導致血清IgG 聚合,使間接法的 試劑 本底加深。超過一周測定的需-20℃保存。凍結血清融解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻并避免產生氣泡。混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。反復凍融會使 抗體 效價跌落,所以測 抗體 的血清標本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存;使用一次性玻璃試管或真空管采血管;并使用非抗凝標本,肝素抗凝血漿會增加OD值,可能與高濃度肝素具有強大的負電荷能吸附酶標記物不易洗脫有關;EDTA、酶抑制劑(如NaN3)可抑制ELISA系統中辣根過氧化物酶活性;血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標本采集時用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當的促凝劑。

  

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