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技術(shù)文章

Technical articles

2021
3-5

酶聯(lián)免疫實驗常見問題解析
酶聯(lián)免疫實驗常見問題因靈敏度高，特異性強在生物科研上得到了廣泛的認可，但對初學者而言，如不注意實驗操作過程中的各個環(huán)節(jié)，可能會對終的實驗結(jié)果產(chǎn)生比較大的影響，比如實驗出現(xiàn)白板，顯色弱靈敏度低，花板無梯度背景高等現(xiàn)象。下面對以上實驗現(xiàn)象進行一一解析。1.白板現(xiàn)象在完成所有實驗步驟進行底物TMB溶液顯色后，酶標板中所有孔的顏色均為無色，即無信號呈現(xiàn)。出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因：試劑已過保質(zhì)期，不同批次稀釋液交叉使用。錯加漏加檢測A，檢測B或者底物溶液TMB。洗板或者加樣過程中，酶標記物...
2021
3-5

上海恒遠為您簡述繪制標準曲線的要點
標準曲線法也稱為外標法或直接比較法，是一種簡便、快速的定量方法，在ELISA實驗中比較常用的一種分析方法。一、做標準曲線樣品檢測時有幾個問題需要注意ELISA試劑盒1、樣品的濃度等指標是根據(jù)標準曲線計算出來的，所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事，否則后面的實驗結(jié)果無從談起。2、設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內(nèi)，人ELISA試劑盒包括上限和下限。而對于呈S型的標準...
2021
3-4

ELISA實驗之空白孔的設置
今天上海恒遠為大家講解ELISA實驗技巧中的空白孔對照。ELISA試劑盒ELISA空白對照有幾種：1.空氣空白水空白：一般是用于儀器調(diào)零的,所有孔數(shù)值減掉該孔數(shù)值。2.底物空白：一般是用于防止底物弱顯色所造成的讀數(shù)偏高，同樣所有孔數(shù)值減掉該孔數(shù)值（只加底物和終止液）3.酶空白：一般在2步法實驗中使用，主要是看酶是否和板有非特異性結(jié)合的，一般不做這個。ELISA空白孔一般設一個，這是為了減除顯色液的OD值。而陰性和陽性標準品比較好是設2個復孔，雖然有點浪費，但為了確保實驗的可靠...
2021
3-4

蛋白質(zhì)提純的五種方法你都知道嗎?
當科研學者們?yōu)榱搜芯磕骋粋€蛋白質(zhì)，必須首先將該蛋白質(zhì)從其他蛋白質(zhì)和非蛋白質(zhì)分子中純化出來，下面就是上海恒遠整理的關(guān)于蛋白質(zhì)的提純方法，只作較簡要介紹供廣大科研愛好者參閱。1、超速離心法此法分離和純化抗原的原理是利用各顆粒在梯度液中沉降速度的不同，使具有不同沉降速度的顆粒處于不同密度梯度層內(nèi)，達到彼此分離的目的。常用的密度梯度介質(zhì)有蔗糖、甘油、CsCl等。用超速離心或梯度密度離心分離和純化抗原時，除個別成分外，極難將某一抗原成分分離出來，故只用于少數(shù)大分子抗原的分離，如IgM、...
2021
3-2

關(guān)于細胞培養(yǎng)這幾點一定要注意了
細胞培養(yǎng)技術(shù)又叫細胞克隆技術(shù)。細胞培養(yǎng)技術(shù)指的是細胞在體外條件下的生長，在培養(yǎng)的過程中細胞不再形成組織（動物），今天的文章中跟大家介紹一些關(guān)于細胞培養(yǎng)的基礎知識！一、細胞培養(yǎng)的基本概念體外培養(yǎng)（invitroculture）包括所有結(jié)構(gòu)層次的培養(yǎng)，即：組織培養(yǎng)（tissueculture）、細胞培養(yǎng)（cellculture）和器官培養(yǎng)（organculture）。細胞培養(yǎng)(Cellculture)指從生物機體取出部分組織分散成單個細胞或直接從機體取出單個細胞，也可把體外培養(yǎng)細...
2021
3-2

ELISA常用的幾個方法優(yōu)缺點你都知道嗎?
ELISA是一種廣泛應用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術(shù)。酶聯(lián)免疫吸附試驗的標準程序，通常是把蛋白、抗體、或激素等（即抗原）直接或是以捕捉抗體（captureAb）固定在固相載體上，再加入一級檢測抗體（primarydetectionAb），形成一個抗原抗體的復合物。如果該抗體已經(jīng)用酶（enzyme）標記了，即可用來直接測定抗原的量，若無，則可利用另一個酶標記的二級抗體來測定抗原的量。測定抗原量的方法是加入該酶的底質(zhì)（substrate），作用后產(chǎn)生出現(xiàn)的顏...
2021
3-2

恒遠產(chǎn)品文獻:小鼠CRH,ACTH,CORT ELISA試劑盒引用文獻
【文獻標題】Reducedgrowthcapacityofpreimplantationmouseembryosinchronicunpredictablestressmodel【作者】XiaoliZhao，RuihongMa，XiaoyuZhang，et.al【作者單位】天津中醫(yī)藥大學第yi附屬醫(yī)院（FirstTeachingHospitalofTianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine）【文獻中引用產(chǎn)品】小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素...
2021
3-1

ELISA常用檢測法—雙抗體夾心法原理介紹
做ELISA實驗，有幾種常見的實驗方法，他們分別是競爭法、捕獲法、間接法、夾心法、而夾心法又可以分為雙抗體夾心法和雙抗原夾心法！在今天的文章中，將詳細得跟大家講述雙抗體夾心法！雙抗體夾心法，其基本原理是將一定量的包被抗體以物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面，加入無關(guān)蛋白載體封閉未結(jié)合位點，然后加入待檢標本，通過加入檢測抗體，酶標記第二抗體后用TMB底物顯色，微孔板中顏色的深淺與待測物的濃度呈正相關(guān)。該方法的適用條件是：含有多個抗原表位的大分子物質(zhì)。因為這種檢測方法需要兩種...

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